WWW.DOCX.LIB-I.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Интернет материалы
 

«EUROPEAN AND MEDITERRANEAN PLANT PROTECTION ORGANIZATION ORGANISATION EUROPEENNE ET MEDITERRANEENNE POUR LA PROTECTION DES PLANTESЕВРОПЕЙСКАЯ И СРЕДИЗЕМНОМОРСКАЯ ...»

EUROPEAN AND MEDITERRANEAN PLANT PROTECTION ORGANIZATION

ORGANISATION EUROPEENNE ET MEDITERRANEENNE POUR LA PROTECTION DES PLANTESЕВРОПЕЙСКАЯ И СРЕДИЗЕМНОМОРСКАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ПО КАРАНТИНУ И ЗАЩИТЕ РАСТЕНИЙ

12/17949

Translation № 74

Перевод № 74

OFFICIAL EPPO TRANSLATIONS OF

INTERNATIONAL PHYTOSANITARY TEXTS

TRADUCTIONS OFFICIELLES DES TEXTES

PHYTOSANITAIRES INTERNATIONAUX

ОФИЦИАЛЬНЫЕ ПЕРЕВОДЫ ЕОКЗР

МЕЖДУНАРОДНЫХ ФИТОСАНИТАРНЫХ ТЕКСТОВ

REGIONAL STANDARDS FOR PHYTOSANITARY MEASURES

EPPO STANDARD PM 7/98 (1)

SPECIFIC REQUIREMENTS FOR LABORATORIES PREPARING ACCREDITATION FOR PLANT PEST DIAGNOSTIC ACTIVITY

NORMES REGIONALES POUR LES MESURES PHYTOSANITAIRES

NORME DE L’OEPP PM 7/98 (1)

EXIGENCES SPECIFIQUES POUR LES LABORATOIRES SE PREPARANT A L'ACCREDITATION POUR UNE ACTIVITE DE DIAGNOSTIC PHYTOSANITAIRE

РЕГИОНАЛЬНЫЕ СТАНДАРТЫ ПО ФИТОСАНИТАРНЫМ МЕРАМ

СТАНДАРТ ЕОКЗР PM 7/98 (1)

СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ К ЛАБОРАТОРИЯМ, ВЕДУЩИМ ПОДГОТОВКУ К АККРЕДИТАЦИИ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ В СФЕРЕ ДИАГНОСТИКИ ВРЕДНЫХ ДЛЯ РАСТЕНИЙ ОРГАНИЗМОВ

(Russian text / Texte en russe / Текст на русском языке)

2012 – 06

OEPP/EPPO

21 Boulevard Richard Lenoir

75011 PARIS

Стандарты EОКЗР

ФИТОСАНИТАРНЫЕ ПРОЦЕДУРЫ

СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ К ЛАБОРАТОРИЯМ, ВЕДУЩИМ ПОДГОТОВКУ К АККРЕДИТАЦИИ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ В СФЕРЕ ДИАГНОСТИКИ ВРЕДНЫХ ДЛЯ РАСТЕНИЙ ОРГАНИЗМОВ

PM 7/98 (1)

Европейская и Средиземноморская организация по карантину и защите растений

Франция, 75011, Париж, бульвар Ришар Ленуар, 21

Сентябрь, 2009 года

Серия РМ 7 – Диагностические протоколы для регулируемых вредных организмов / Diagnostic protocols for regulated pests /

Protocoles de diagnostic pour les organismes rglements

РМ 7/98 (1)

Европейская и Средиземноморская организация по карантину и защите растений

European and Mediterranean Plant Protection Organization

Organisation Europenne et Mditerrannne pour la Protection des Plantes

Специфические требования к лабораториям, ведущим подготовку к аккредитации деятельности в сфере диагностики вредных для растений организмов / Specific requirements for laboratories preparing accreditation for a plant pest diagnostic activity / Exigences spcifiques pour les laboratoires se prparant l'accrditation pour une activit de diagnostic phytosanitaire

Особая сфера применения

Настоящее руководство содержит специфические требования к управлению качеством для лабораторий, ведущих подготовку к аккредитации в соответствии со Стандартом ISO/IEC 17025 «Общие требования к компетенции испытательных и калибровочных лабораторий» (приводятся ссылки на соответствующие пункты Стандарта ISO/IEC 17025). Следует отметить, что в стандартах ЕОКЗР глагол «следует» обозначает наивысшую степень долженствования.





Утверждение и пересмотр

Настоящий стандарт впервые утверждён в сентябре 2009 года.

1. Введение

Разработка систем управления качеством (которые также упоминаются как системы управления или системы качества) и аккредитация стали проблемными вопросами для многих лабораторий в регионе ЕОКЗР. Стандарт PM 7/84 «Основные требования к управлению качеством в лабораториях по диагностике вредных для растений организмов» был утвержден в 2007 году. В Стандарте PM 7/84 описываются основные требования с целью оказания помощи лабораториям, проводящим диагностику вредных для растений организмов, в создании системы управления качеством. В настоящем новом стандарте описываются дополнительные требования для лабораторий, подающих заявку на аккредитацию. Он основывается на Стандарте ISO/IEC 17025 «Общие требования к компетенции исследовательских и калибровочных лабораторий», и его следует использовать вместе со Стандартом PM 7/84. Как правило, лаборатории подают заявку только на аккредитацию проведения диагностики наиболее значимых для них вредных организмов, а не всех вредных организмов, диагностику которых они могут проводить.

Аккредитация на соответствие Стандарту ISO/IEC 17025 проводится национальными органами по аккредитации. Важно, чтобы лаборатории разработали эффективные процедуры осуществления коммуникации и установили постоянный контакт со своим национальным органом по аккредитации на время всего процесса.

Настоящий документ касается качества диагностики, а вопросы здоровья и безопасности особым образом в нём не рассматриваются. Однако деятельность лаборатории должна соответствовать национальным регламентациям в области здоровья и безопасности.

2. Сфера применения аккредитации: фиксированная и гибкая

Исторически сложилось так, что аккредитация лабораторий, как правило, основывается на фиксированной сфере применения, которая чётко и однозначно определяет серию тестов, на которые распространяется аккредитация (например, иммунофлюоресцентный анализ на выявление Ralstonia solanacearum в клубнях картофеля). Однако это не позволяет с легкостью добавлять новые или модифицированные тесты в сферу деятельности лаборатории даже в том случае, если компетентность лаборатории в проведении и валидации сходных тестов уже была оценена органом по аккредитации. Несмотря на то, что заявки на расширение сферы деятельности можно подавать в любое время, сроки проведения аккредитации в действительности могут помешать быстрому реагированию на требования клиента. Вследствие этого была разработана концепция гибкой сферы применения аккредитации.

Гибкая сфера применения аккредитации позволяет лаборатории выполнять определённые тесты и сообщать о результатах, как об аккредитованных, даже в том случае, если эти тесты чётко не указаны в сфере деятельности лаборатории («Требования к аккредитации с гибкой сферой применения» EA-2/15, 2008). Примерами ситуаций, когда может возникнуть необходимость в гибкой сфере применения аккредитации, являются нижеследующие:

оптимизация исходного теста;

модификация существующего теста с целью расширения области его применения (например, для работы с новыми природными субстратами);

включение теста, эквивалентного уже аккредитованному.

Концепция гибкой сферы применения аккредитации предполагает такую степень гибкости, которая, как правило, согласовывается с органом по аккредитации. Тем не менее, следует отметить, что эта степень гибкости по-разному интерпретируется на национальном уровне. В настоящее время опыт фитосанитарных лабораторий показывает, что при гибкой сфере применения аккредитации лаборатория несёт больше ответственности за подтверждение надёжности и достоверности тестов, их соответствия обстоятельствам использования и подтверждение того, что они проводятся компетентно и единообразно. Если лаборатория принимает решение заявить, что тест аккредитован, а проведённый впоследствии аудит выявляет проблемы с используемыми процедурами, результаты тестов могут быть недостоверными, и может возникнуть необходимость в отмене всех выданных результатов диагностики. Поэтому настоятельно рекомендуется наработать опыт с фиксированной сферой применения аккредитации перед тем, как лаборатория подаст заявку на аккредитацию с гибкой сферой применения, поскольку в обоих случаях должны выполняться все требования Стандарта ISO/IEC 17025. Однако лаборатория уже может быть аккредитована на выполнение другой деятельности отличной от диагностики вредных для растений организмов. Опыт с фиксированной сферой применения аккредитации в выполнении другой деятельности может быть достаточным для прямой подачи заявки на аккредитацию с гибкой сферой применения в отношении деятельности, связанной с диагностикой вредных для растений организмов.

3. Термины и определения

Определения терминов, используемых в настоящем стандарте, приведены в Стандарте PM 7/76 «Использование диагностических протоколов ЕОКЗР» (пересмотренная версия находится на стадии подготовки). Определения критериев эффективности приведены во введении к стандартам ЕОКЗР серии РМ 7.

В настоящем стандарте термин «тест» подразумевает применение метода по отношению к определённому вредному организму и определённому природному субстрату. Методы, о которых идет речь, включают в себя биотесты, биохимические методы, методы пептидных карт, методы выделения или экстрагирования, молекулярные методы, морфологические и морфометрические методы, оценку патогенности и серологические методы.

4. Требования к управлению (Стандарт ISO 17025, пункт 4)

Лаборатория должна установить, и далее применять и поддерживать систему управления качеством, охватывающую все материально-технические средства и деятельность, находящуюся в сфере аккредитованной диагностики вредных для растений организмов.

Система управления должна включать описания материально-технических средств и мероприятий (включая подробную информацию о клиентах и диагностируемых вредных организмах), на которые она распространяется. Система качества должна быть оформлена документально, а документы, касающиеся качества, должны храниться в архиве (смотрите также ниже).

Как указано в Стандарте PM 7/84, система управления в лаборатории должна обеспечивать, чтобы:

имелись ресурсы, подходящие для проведения диагностики, например, персонал, материально-технические средства и расходные материалы (также смотрите раздел «Технические требования»);

приобретённые ресурсы, реагенты и расходные материалы соответствовали их предполагаемому использованию;

обязанности и задачи персонала были чётко определены (например, организационными схемами) и соответствующим образом распределены;

возможные конфликты интересов между персоналом и выполняемой деятельностью вовремя распознавались и предотвращались;

обучение документировалось и оценивалось (также смотрите раздел «Технические требования»);

персонал имел доступ к процедурам и инструкциям и применял их; это относится и к стандартным операционным процедурам (СОП);

заказчик информировался по запросу о значимой для него информации, касающейся диагностики его образца;

любая субподрядная работа выполнялась такой лабораторией, которая бы соблюдала требования настоящего стандарта, что должно проверяться основной аккредитованной лабораторией (как минимум, должна быть составлена декларация о соответствии);

заказчику гарантировалась конфиденциальность результатов диагностики;

существовал и применялся механизм работы с жалобами;

существовали и применялись механизмы записи, анализа и исправления всех отклонений от процедур или требований заказчика;

вся документация, указанная выше, хранилась и архивировалась. Система управления качеством должна периодически пересматриваться руководителями. Это означает периодическое проведение оценки всех компонентов системы, а также повседневный учёт отклонений в системе и последующих корректирующих действий, которые были предприняты.

4.1 Обязанности руководителей (Стандарт ISO 17025, пункт 4.2.3)

Руководители лаборатории должны выполнять обязанности по достижению целей управления качеством и постоянно совершенствовать эффективность системы управления. Они должны предоставлять подтверждение выполнения этих обязанностей.

4.2 Постоянное совершенствование (Стандарт ISO 17025, пункт 4.10)

Руководители должны периодически пересматривать систему управления лабораторией, включая проведение тестов, для обеспечения того, чтобы эта система продолжала быть пригодной и эффективной, а также для того, чтобы вносились необходимые изменения или усовершенствования. Лаборатория должна применять программу непрерывного совершенствования. Внутренние механизмы и внешняя оценка могут предоставлять необходимую информацию. Внутренние механизмы включают в себя:

Определение задач в сфере качества и соответствующих индикаторов качества (например, уменьшение количества жалоб в следующем году на Х %). Эти показатели должны пересматриваться руководителями.

Организацию собраний персонала для того, чтобы:

запланировать профилактические мероприятия и оценить эффективность корректирующих действий;

провести тщательный анализ результатов внутреннего аудита;

провести анализ жалоб и связанных с ними корректирующих действий и т.п.;

определить потребности в обучении;

собрать предложения персонала по совершенствованию работы.

Процедуры получения обратной связи от заказчиков.

Для постоянного совершенствования важными элементами также являются оценка с помощью внешнего аудита и результаты квалификационных или других межлабораторных тестов.

5 Технические требования (Стандарт ISO 17025, пункт 5)

5.1 Общие положения (Стандарт ISO 17025, пункт 5.1)

Смотрите тот же раздел в Стандарте PM 7/84.

5.2 Персонал (Стандарт ISO 17025, пункт 5.2)

Смотрите тот же раздел в Стандарте PM 7/84.

5.3 Помещения и условия окружающей среды (Стандарт ISO 17025, пункт 5.3)

Смотрите тот же раздел в Стандарте PM 7/84.

5.4 Методы диагностики (Стандарт ISO 17025, пункт 5.4)

5.4.1 Общие положения (Стандарт ISO 17025, пункт 5.4.1)Лаборатория должна применять подходящие методы и процедуры для всех тестов в рамках своей сферы деятельности. Это относится к методам отбора образцов (в соответствующих случаях), способам обращения с образцами, транспортировке, хранению, приготовлению препаратов и проведению анализов образцов. Предполагается, что диагностические лаборатории должны понимать биологию организмов и принимать её во внимание при вторичной выборке образцов и/или при подготовке образца для анализа. Приобретённые реагенты и расходные и другие материалы должны соответствовать их предполагаемому использованию.

Все инструкции, стандарты, технические руководства и справочная информация, необходимые для работы лаборатории, должны постоянно обновляться, и у персонала всегда должен быть к ним доступ. Отклонение от СОП при применении тестов может иметь место только в том случае, если оно оформлено документально, технически обосновано и разрешено соответствующим лицом.

5.4.2 Выбор тестов (Стандарт ISO 17025, пункт 5.4.2)

Лаборатория должна использовать диагностические тесты, которые соответствуют имеющимся условиям (смотрите Стандарт ЕОКЗР PM 7/76 «Применение диагностических протоколов ЕОКЗР»). Тесты, описанные законодательно (например, в законодательстве ЕС или национальном законодательстве), являются обязательными для соответствующей страны. Если обязательный тест отсутствует, то предпочтение следует отдавать тестам, опубликованным в качестве международных, региональных или национальных стандартов. В тех случаях, когда такие тесты отсутствуют, или если они могут быть усовершенствованы, то можно использовать разработанные в лаборатории или адаптированные тесты.

Лаборатория должна обеспечить, чтобы использовалась последняя и признанная надёжной и достоверной версия теста, если это соответствует ситуации и является возможным. В случае необходимости к тесту должна прилагаться дополнительная подробная информация для обеспечения последовательности в его применении.

Лаборатория, проводящая подготовку к аккредитации, должна использовать только те тесты, которые прошли валидацию. Тесты могли пройти валидацию, если для этого имелись подходящие данные. В противном случае тесты должны пройти процедуру валидации в лаборатории (смотрите пункт 5.4.3). При использовании прошедшего валидацию теста, лаборатория должна предоставить объективное подтверждение того, что она может проводить этот тест в соответствии с установленными характеристиками эффективности (смотрите пункт 5.4.4). Тест считается полностью прошедшим валидацию, если он даёт данные, соответствующие следующим критериям эффективности: аналитической чувствительности, аналитической специфичности, воспроизводимости и повторяемости. В зависимости от сферы применения теста может также возникнуть необходимость в определении его селективности. Если лаборатория вносит изменения в тест, прошедший валидацию, следует проанализировать и документально оформить решение, требуется ли проведение валидации или проверки этого изменения.

Не все тесты, включённые в диагностические протоколы ЕОКЗР, имеют критерии эффективности. Проведённая в 2008 году проверка по использованию тестов, включённых в диагностические протоколы ЕОКЗР (Petter et al., 2009), показала, что широко используются те тесты, которые представлены в Дополнении 1 (в стадии подготовки). Следовательно, можно считать, что эти тесты имеют подходящий уровень надёжности в отношении повторяемости, воспроизводимости и селективности. Лаборатория, применяющая эти тесты, должна, по меньшей мере, предоставить данные для валидации в отношении аналитической чувствительности. Также может понадобиться предоставить дополнительные данные по аналитической специфичности в зависимости от местных условий (например, вероятность ложных реакций на близкородственных организмах). Как только такие данные предоставляются, эти тесты считаются прошедшими валидацию. Программа регулярного пересмотра диагностических протоколов ЕОКЗР включает в себя добавление данных о валидации.

Тесты, прошедшие валидацию и имеющие предоставленные критерии эффективности, в настоящем документе считаются «стандартными тестами», а в стандарте ISO 17025 они называются «стандартными методами».

5.4.3 Валидация тестов (Стандарт ISO 17025, пункт 5.4.5)

Валидация проводится для предоставления объективных данных о том, что данный тест подходит к условиям его использования (смотрите Стандарт ЕОКЗР PM 7/76, в котором описаны разные типы предполагаемого использования).

В сфере диагностики вредных для растений организмов тест должен быть подходящим для проведения повседневной диагностики. Как уже говорилось ранее, минимальными критериями эффективности теста, которые должны быть определены, являются аналитическая чувствительность, аналитическая специфичность, повторяемость, воспроизводимость и, в соответствующих случаях, селективность. В том случае, если значения для этих критериев отсутствуют, или к ним нет доступа (например, к опубликованным источникам), лаборатория должна сама восполнить недостающие данные или обосновать, почему они не могут быть получены. Если значения критериев эффективности доступны частично, лаборатория должна проверить, что она может проводить тест в соответствии с ними (смотрите пункт 5.4.4). Валидация должна проводиться на справочном материале (смотрите определение в Стандарте PM 7/84), включая искусственно заражённые («обогащенные») образцы. При использовании культур или изолятов для биологических тестов необходимо обеспечить подтверждение их вирулентности.

Также можно проводить валидацию теста путём сравнения со «стандартным тестом». Руководство по процедуре такого рода валидации приводится в Дополнении 2. Тем не менее, в таком случае валидируемый тест нельзя принимать в качестве «стандартного теста», поскольку он не имеет всех критериев эффективности. Данный процесс может только показать, что этот тест является настолько же хорошим, как и стандартный тест.

Собранные данные и результаты проведённых лабораторией валидаций (в особенности в отношении воспроизводимости), а также результаты межлабораторного сравнения (оценка эффективности того, как тест работает), также могут свидетельствовать о стабильности теста, например, до какой степени смена реагентов или изменение условий влияют на установленные значения эффективности теста. Также они могут предоставить данные о диагностической чувствительности и диагностической специфичности путём сравнения с альтернативным(и) тестом(ами).

Процедуры валидации, описанные в настоящем документе (и в особенности пояснения, приведённые в таблицах 4-9 в Дополнении 5) следует рассматривать как общее руководство, в соответствии с которым можно проводить валидацию теста. Данные, приведённые в этих таблицах, основаны на опыте, который специалисты Группы экспертов ЕОКЗР по диагностике приобрели в процессе проведения валидаций. Может возникнуть необходимость в отклонении от настоящего руководства в зависимости от сочетаний вредных организмов и растений. В таких случаях следует документально фиксировать причины таких отклонений. В настоящем документе невозможно предоставить подробное описание для каждого сочетания.

Тесты по диагностике вредных для растений организмов могут быть качественными или количественными. Качественный тест устанавливает присутствие или отсутствие вредного для растений организма в образце. Количественный тест устанавливает количество особей вредного для растений организма в образце. Во всех возможных случаях для теста необходимо определить порог возможностей обнаружения. Однако при выявлении вредных для растений организмов эти пороги не всегда могут быть точно установлены. Существуют организмы, которые невозможно выделить в культуру (облигатные патогены), количество которых нельзя определить (грибы), которые присутствуют только в растении, или которые нельзя выделить в чистом виде (например, фитоплазмы). По этой причине точная концентрация этих организмов не может и едва ли когда-нибудь сможет быть установлена точно, и поэтому необходимо использовать приблизительные подсчёты. Даже в отношении организмов, которые можно выделить в чистую культуру (многие бактерии и вирусы), концентрация может быть подсчитана только приблизительно (например, КОЕ или мг/мл). Такая оценка часто бывает основана на непрямом измерении.

Процесс валидации

Как указано в Стандарте ISO 17025 «лаборатория должна вести официальные записи о полученных результатах и процедурах, использованных для валидации».

Общий процесс валидации описан ниже (также смотрите Рисунок 1). Более подробное руководство приводится в таблицах 4-9 в Дополнении 5.

Определите область использования теста, например, выявление и/или идентификация организма Х в природном субстрате У методом Z с учётом всех специфических требований, связанных с условиями применения теста (примеры описаны в Стандарте PM 7/76).

Рассмотрите технические требования для определения рабочих характеристик эффективности: аналитической специфичности, селективности, воспроизводимости и повторяемости, принимая во внимание руководство, приведенное в таблицах 1-6, согласно требованиям. Затем определите тип и состав образцов, необходимых для валидации.

Запланируйте и проведите валидацию по отдельным или комбинированным характеристикам эффективности. Рекомендуется следовать этапам, приведённым на Рисунке 1.

Представьте результаты в отчёте по валидации с заключением о соответствии теста требованиям, определённым в пункте 1.

Использование бланка «Заявление о валидации теста» может быть важным, и его можно представить по форме, приведённой в Дополнении 3.

1667510146685Определите организм

00Определите организм

1504315243840Определите природный субстрат

00Определите природный субстрат

4471035-635Рис. 1 Процесс валидации

00Рис. 1 Процесс валидации

25952459144000

259524518923000

354965020066000619379020066000259524528638500166751034925Определите тест

00Определите тест

40894099060Определите предполагаемые критерии характеристик эффективности

00Определите предполагаемые критерии характеристик эффективности

259524543815001581150124460Сверьтесь с таблицами 1-6

00Сверьтесь с таблицами 1-6

25965156921500474980188595Определите тип/состав материала для проведения валидации

00Определите тип/состав материала для проведения валидации

2596515120650001196975273050Составьте план проведения валидации

00Составьте план проведения валидации

259651521780500

3013075294005004139565210185004251960111125совершенствование путем корректировки теста

00совершенствование путем корректировки теста

115062064135Аналитическая специфичность/селективность*

00Аналитическая специфичность/селективность*

5673090108585Выберите новый тест

00Выберите новый тест

2529839280035плохая

00плохая

1320166280035хорошая

00хорошая

3383915154940001991995889000

343471549530003459480278130006193790193040003590290160020СТОП

тест не может быть признан валидным

00СТОП

тест не может быть признан валидным

199644077470001196975276860Аналитическая чувствительность*

00Аналитическая чувствительность*

394081010287000331787529527500307276522161500413956523495совершенствование путем корректировки теста

00совершенствование путем корректировки теста

199199522161500

3348990254000005673090120650Выберите новый тест

00Выберите новый тест

2529841244475плохая

00плохая

1386840252095хорошая

00хорошая

622681019812000335089516510000359029066040СТОП

тест не может быть признан валидным

00СТОП

тест не может быть признан валидным

199199529781500

1150620243205Повторяемость/воспроизводимость

00Повторяемость/воспроизводимость

45834304254500389445542545003119120187960001991995187960004086860148590совершенствование путем корректировки теста

00совершенствование путем корректировки теста

5673090103505Выберите новый тест

00Выберите новый тест

2596515151130плохая

00плохая

1443990151130хорошая

00хорошая

34302701397000

34347154445000335089585090001991995151130003629025237490СТОП

тест не может быть признан валидным

00СТОП

тест не может быть признан валидным

1316355129540Отчет о валидации

00Отчет о валидации

3698875271780*в зависимости от предполагаемого использования теста оценка аналитической чувствительности может проводиться до оценки специфичности и селективности

00*в зависимости от предполагаемого использования теста оценка аналитической чувствительности может проводиться до оценки специфичности и селективности

19919957429500

49847585725Заявление о том, что тест успешно охватывает сферу его применения

00Заявление о том, что тест успешно охватывает сферу его применения

5.4.4 Проверка эффективности работы лаборатории по проведению определённого теста (ISO пункт 5.4.2, второй параграф, последнее предложение)

Лаборатория должна подтвердить, что она может должным образом проводить выбранный стандартный тест для предполагаемого использования. В случае внесения каких-либо изменений в стандартный тест, проверка должна быть проведена повторно.

Процесс, необходимый для предоставления объективного подтверждения того, что лаборатория является компетентной для проведения стандартного теста в соответствии с установленными для него характеристиками эффективности, описан ниже.

Тесты, которые выходят за рамки первоначальной сферы применения, требуют повторной валидации согласно пункту 5.4.3 (например, при выявлении на новом хозяине). Если лаборатория вносит существенные изменения в стандартный тест, он должен вновь пройти валидацию. Проверка может быть осуществлена путём участия в квалификационных тестах или в межлабораторных сравнительных тестах (например, ринг-тестах и совместных исследованиях), при условии, что они позволяют выполнять требования, приведённые в Таблице 1.

Выбор реактива может иметь решающее значение для эффективности теста. Изменение реактива (или его марки или партии) или получение реактива у другого поставщика может повлиять на эффективность теста. В таких случаях проверка эффективности реактива должна проводиться путём сравнения с ранее использовавшимся реактивом или в соответствии с тем, что указано в колонке 1 и 2 Таблицы 1.

Таблица 1 Руководство по проверке рабочих критериев

Аналитическая чувствительность Аналитическая специфичность Повторяемость Воспроизводимость

Проведите анализ не менее 5-10 образцов с установленным порогом возможностей выявления.

Эту проверку можно сочетать с проверкой повторяемости и воспроизводимости Выберите несколько из наиболее значимых организмов-мишеней (например, разные штаммы) и организмов, не являющихся мишенями. Тесты должны проводиться со средними уровнями численности организмов. Проведите не менее 2 опытов с 3 уровнями численности организма-мишени1 (низким2/средним/ высоким), причем тесты должны проводиться одним и тем же лицом, на одном оборудовании и в один и тот же день. Проведите не менее 3 опытов с 3 уровнями численности организма-мишени1 (низким2/средним/ высоким), но в разное время, по возможности разными лицами, а в случае, когда это существенно, - с использованием разного оборудовании.

1 можно использовать искусственные выборки, созданные из одного образца

2 около порога возможностей выявления

Процесс проверки (Рис. 2)

Проведите валидированный тест согласно описанию или с небольшими изменениями для того, чтобы учесть местные условия (например, поставщика реактива или оборудования, если на этот счёт нет специфических требований для проведения валидированного теста) с целью оценить соответствие лаборатории значениям критериев эффективности, приведённым в сведениях по валидации (смотрите руководство в Таблице 1). Необходимость проведения проверки селективности отсутствует.

Результаты проверочного теста:

Несоответствие значениям критериев эффективности: переходите к пункту 3;

Соответствие значениям критериев эффективности: лаборатория может применять этот тест в повседневном режиме – переходите к пункту 4.

Если отклонение от условий, описанных в прошедшем валидацию тесте, влияет на результаты, изучите причины этого отклонения. Откорректируйте и выполните повторную проверку теста или, если потребуется, повторную валидацию в соответствии с процедурой, описанной в разделе «Валидация тестов». Если соответствие значениям критериев эффективности отсутствует, исследуйте, являются ли причиной этого те минимальные изменения, которые были внесены в тест. Если это не так, займитесь поиском консультации извне (например, свяжитесь с автором теста).

Представьте результаты в отчёте о проверке с заключением, соответствует ли проверенный тест требованиям, указанным в пункте 1.

Использование бланка «Заявление о проверке теста» может быть важным, и его можно представить в форме, приведённой в Дополнении 4.

5.4.5 Ненадёжность измерения (ISO 17025 5.4.6)

Лаборатории должны стараться определить факторы, влияющие на ненадёжность теста, такие как персонал, оборудование и биологические свойства (например, серотипы, патотипы). Во всех возможных случаях, должны применяться подходящие меры для контроля возможной ненадёжности. Если меры не приняты, должны фиксироваться причины такой ситуации, а заказчик должен быть полностью информирован о ненадёжности в тесте.

Несмотря на то, что в большинстве случаев тесты, используемые для диагностики вредных для растений организмов, дают не количественные результаты, эти результаты могут основываться на измерениях (морфометрических данных, подсчёте клеток). Они могут представлять собой всего лишь часть диагностического процесса, но если это является важным с точки зрения диагностики, то её ненадёжность должна быть оценена.

5.5 Оборудование (ISO пункт 5.5)

Смотрите тот же раздел в Стандарте PM 7/84.

5.6 Справочные материалы (ISO пункт 5.5.3)

Смотрите тот же раздел в Стандарте PM 7/84

5.7 Отбор образцов (ISO пункт 5.7)

Смотрите тот же раздел в Стандарте PM 7/84

5.8 Обращение с образцами (ISO пункт 5.8)

Смотрите тот же раздел в Стандарте PM 7/84

64135167640Рис.2 Процесс проверки

00Рис.2 Процесс проверки

429768019367500057099201936750002256790609092000426021560382150042595805449570004258945444817500225679044799250037350703863975002256790386397500323913529171900032385002108835003238500159131000323850011144250022567901784350Проведите тест

00Проведите тест

51860453997325проведите корректировку

00проведите корректировку

12242806356350Лаборатория может проводить тест в соответствии с установленными критериями эффективности

00Лаборатория может проводить тест в соответствии с установленными критериями эффективности

32912056356350Лаборатория не может проводить тест в соответствии с установленными критериями эффективности

00Лаборатория не может проводить тест в соответствии с установленными критериями эффективности

39077904057015нет

00нет

19462754090035есть

00есть

11112505766435Отчет о проверке

00Отчет о проверке

35363154672965Выясните причины

00Выясните причины

21323303082925Соответствие значениям эффективности

00Соответствие значениям эффективности

21323302268220Определите, являются ли значения эффективности такими же, как и в тесте, прошедшем валидацию

00Определите, являются ли значения эффективности такими же, как и в тесте, прошедшем валидацию

148907588900Выберите прошедший валидацию (стандартный) тест

00Выберите прошедший валидацию (стандартный) тест

126047580645Определите изменённые реагенты или условия проведения теста

00Определите изменённые реагенты или условия проведения теста

57118251397000

5073015-3175выяснены

00выяснены

56826158509000

492061599695Консуль-тация извне

00Консуль-тация извне

342519063500не выяснены

00не выяснены

461327515113000

5.9 Обеспечение качества диагностики (ISO пункт 5.9)

Смотрите тот же раздел в Стандарте PM 7/84

6 Оповещение о результатах (ISO пункт 5.10.3)

Смотрите Стандарт ЕОКЗР РМ 7/77 «Ведение документации и оповещение о диагностике».

Справочная литература

Группа AFNOR (1995). XP V03-111 «Анализ сельскохозяйственных и продовольственных продуктов: протокол внутрилабораторной оценки альтернативного метода качественного анализа по сравнению со справочным методом», Французская ассоциация стандартизации/Association Franaise de Normalisation, La Plaine Saint-Denis (FR).

Европейская ассоциация по аккредитации / EA (2008) EA-2/15 «Требования к аккредитации с гибкой сферой применения», http://www.eurolab.org/docs/EA/EA-2_15.pdf. (по состоянию на 16 сентября 2009 года).

Петтер Ф. / Petter F, Сюффер М. / Suffert M и Мак Мюллен М. А. С. / McMullen MAS (2010): Результаты опроса по использованию диагностических протоколов ЕОКЗР. Бюллетень ЕОКЗР, т. 40, стр. 121 6 126.

Хьюз К. Дж. Д. / Hughes KJD, Гриффин Р. Л. / Griffin RL, Томлинсон Дж. А. / Tomlinson JA, Бунхэм Н. /Boonham N, Инман А. Дж. / Inman AJ и Лейн С. / Lane C (2006) «Разработка одноэтапного анализа ПЦР в реальном времени для диагностики Phytophthora ramorum». Фитопатология/Phytopathology 96: 975-981.

ISO/IEC (2005) Стандарт 17025 «Общие требования к компетенции испытательных и калибровочных лабораторий» (доступен на сайте: http://www.iso.org).

ISO (2003) ISO 16140 «Микробиология продуктов питания и кормов животных: протокол по валидации альтернативных методов» (доступен на сайте: http://www.iso.org).

Дополнение 1 (в процессе подготовки): перечень тестов, внесённых в диагностические протоколы ЕОКЗР и имеющих широкое применение

Этот перечень будет подготовлен совместно с соответствующими группами экспертов ЕОКЗР по диагностике.

Дополнение 2: Процедура валидации теста путём его сравнения со «стандартным тестом»

Сравнение теста со «стандартным тестом» должно проводиться следующим образом:

Проведите тест 3 раза с организмом-мишенью и 3 раза с организмами, не являющимися мишенями, как это указано в Таблице 2. Образцы обрабатываются двумя тестами одновременно. Следует отметить, что данная процедура может быть не применима ко всем областям, например, к морфологической идентификации насекомых.

Количество образцов, указанное в этой таблице, было определено путём сравнения с опубликованными стандартами, например, Стандартом ISO 16140 «Микробиология продуктов питания и кормов для животных: протокол по валидации альтернативных методов» (ISO, 2003 г.) и Стандарта AFNOR XP V03-111 «Анализ сельскохозяйственных и продовольственных продуктов. Протокол по внутрилабораторной оценке альтернативного метода качественного анализа по сравнению со справочным методом» (AFNOR, 1995 г.).

Соотношение результатов, полученных при помощи стандартного теста и нового теста, должны оцениваться для различных уровней численности вредных организмов. Результаты могут быть представлены так, как показано в Таблице 3, и могут быть рассчитаны сравнительные характеристики эффективности.

Таблица 2: Минимальное количество образцов, необходимое при проведении сравнения теста со «стандартным тестом».

Тип материала Уровень численности организма

Низкий Средний Высокий

Изоляты чистых культур организма-мишени или образцы, искусственно заражённые организмом-мишенью 10 7 5

Изоляты чистых культур организма, не являющегося мишенью, или образцы, искус-ственно заражённые организмом, не являющимся мишенью - от 22 до 44* -

Образцы, заражённые организмом-мишенью естественным образом Готовятся соответствующие серии разбавлений с 15 положительными образцами, которые были предварительно идентифицированы при помощи стандартных тестов, с целью достижения порога возможностей выявления стандартного теста.

* общее количество образов организмов, не являющихся мишенью, не должно превышать общее количество образцов организма-мишени более чем в два раза.

Дополнение 3

Заявление о валидации теста

Название теста:

Сфера применения теста:

Дополнительные комментарии :Документы по прохождению теста валидации и требования, которым он должен соответствовать, имеются и хранятся в лаборатории. Документы включают в себя лабораторные справочники и прочую информацию, указанную ниже, которая демонстрирует, каким образом процедуры проходили валидацию в этом исследовании.

Характеристики эффективности

A B C D Где найти документацию

Аналитическая чувствительность Аналитическая специфичность Селективность (в соответствующих случаях) Повторяемость Воспроизводимость Прочая информация (не обязательна) A = Данные, полученные в экспериментах, проведённых самой лабораторией.

B = Данные, полученные при проведении квалификационных тестов или ринг-тестов.

C = Информация, полученная от производителей.

D = Внешняя информация (литература и т.д.).

Таблица 3: Пример результатов сравнения стандартного и нового теста

Стандартный тест

Новый тест

+

-

Итого

+ 119697583185ПО

00ПО

77279583185ПС

00ПС

69

3 72

- 1196975-7620ОС

00ОС

772795-7620ОО

00ОО

6

12 18

Итого 75

15 90

Таблица 3 основана на работе Хьюза и др. / Hughes et al., 2006. Цифры в таблице приведены для наглядности.

ПС (положительное совпадение), ПО (положительное отклонение), ОО (отрицательное отклонение), ОС (отрицательное совпадение).

Положительные (+) и отрицательные (-) результаты для 90 образцов, проанализированных при помощи обоих тестов, показывают диагностическую чувствительность (ПС/(ПС+ND)), диагностическую специфичность (ОС/(ОС+ПО)) и относительную точность (ПС+ОС)/(ПС+ПО+ОО+ОС). Диагностическая чувствительность = 92 %, Диагностическая специфичность = 80%; Относительная точность = 90%.

Где найти документацию

Диагностическая чувствительность Диагностическая специфичность На основании приведённого выше заявления тест считается прошедшим валидацию и соответствующим сфере его применения.

Имя заглавными буквами: Должность эксперта в лаборатории:

Подпись: Дата:

Имя заглавными буквами: Должность эксперта в лаборатории:

Подпись: Дата:

Дополнение 4

Заявление о проверке теста

Название теста:

Стандартный тест:

Область применения стандартного теста:

Небольшие изменения:

Документы по прохождению теста валидации и требования, которым он должен соответствовать, имеются и хранятся в лаборатории. Документы включают в себя лабораторные справочники и прочую информацию, указанную ниже, которая демонстрирует, каким образом проводился проверочный тест в этом исследовании.

Критерии эффективности Значения, полученные в стандартном тесте Соответствует требованиям стандартного теста

(да или нет) Где найти документацию

Аналитическая чувствительность Аналитическая специфичность Повторяемость Воспроизводимость На основании приведённого выше заявления проверка теста считается подтверждающей его соответствие сфере его применения.

Имя заглавными буквами: Должность эксперта в лаборатории:

Подпись: Дата:

Имя заглавными буквами: Должность эксперта в лаборатории:

Подпись: Дата:

Дополнение 5 – Таблицы, в которых даётся подробное руководство для процесса валидации по сфере деятельности (бактериология, ботаника, энтомология, нематология и вирусология)

Таблица 4. Бактериология

Данные, приведённые в таблицах, основаны на опыте по валидации, полученном специалистами групп экспертов ЕОКЗР, занимающихся вопросами диагностики. Может возникнуть необходимость в отклонении от данного руководства в зависимости от сочетаний вредных организмов и растений. В таких случаях следует документально фиксировать причины этих отклонений.

Метод выделения организма-мишени из природного субстрата

Примечание: валидация метода выделения всегда проводится при помощи теста.

Аналитическая чувствительность Метод должен позволять выделить жизнеспособные клетки бактерии-мишени из материала образца для обеспечения чувствительного выявления. Проведите выделение из не менее трех образцов с высоким, средним и низким уровнями заражённости.

Образцы могут состоять из материала с явными признаками заражения (диагностика), или они могут быть подготовлены путём добавления заражённого материала с известной концентрацией клеток бактерии-мишени к материалу образца (выявление латентного заражения или засорения)

Аналитическая специфичность Данный параметр не является важным. Выделение организма-мишени из образца является неспецифичным по определению.

Селективность Данный параметр не является важным. Выделение организма-мишени из образца по определению не является специфичным.

Повторяемость Проведите выделение из 8-и репликатных образцов. Для выявления латентного заражения, повторяемость должна быть подтверждена около порога аналитической чувствительности.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Молекулярные методы, например, гибридизация, ПЦР и ПЦР в реальном времени

Примечание: этот этап также включает в себя методы выделения ДНК из материала образцов.

Аналитическая чувствительность Проведите анализ не менее 3-х серий экстрактов заражённых образцов в пределах от 10 до 106 клеток организма-мишени на миллилитр. Предпочтительно проводить данную процедуру путём десятикратного разбавления суспензий клеток бактерии-мишени в экстрактах образцов. Определите наименьшую концентрацию клеток, обеспечивающую положительный результат теста.

Если после трех серий не получены стойкие результаты, следует подготовить дополнительные серии и провести их анализ. Аналитическая чувствительность связана со специфическим рядом параметров теста, которые необходимо точно определить и стандартизировать, например, с торговой маркой реагентов для ПЦР (в частности, ДНК-полимеразы), а также с условиями проведения цикла ПЦР.

Аналитическая специфичность Проведите анализ (во-первых) штаммов бактерии-мишени, распространяющийся на генетическое разнообразие, разное географическое происхождение и растения-хозяева и (во-вторых) ряда бактерий, не являющихся мишенями, в особенности тех бактерий, которые встречаются в образцах. Используйте суспензии клеток чистых культур в соотношении, примерно, 106 клеток на миллилитр.

Кроме того, результаты теста могут быть подтверждены компьютерным (in silico) сравнением последовательностей зонда и праймера с последовательностями в геномных библиотеках.

Селективность Определите относительную нечувствительность теста к вариациям материала образца, например, используя различные сорта растения-хозяина.

Повторяемость Проведите анализ 8-и репликатов экстрактов заражённых образцов со средним и низким уровнями заражённости. Для выявления латентной инфекции, повторяемость должна быть подтверждена около порога аналитической чувствительности.

Эта оценка позволяет получить данные об уровне недостоверности результата теста.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Серологические методы: IF и ELISA

Аналитическая чувствительность Проведите анализ не менее 3-х серий экстрактов заражённых образцов в пределах от 100 до 106 клеток организма-мишени на миллилитр. Предпочтительно проводить данную процедуру путём десятикратного разбавления суспензии клеток бактерии-мишени в экстрактах образцов. Определите наименьшую концентрацию клеток, обеспечивающую положительный результат теста при рабочем значении разбавления антисыворотки или антител.

Если после трех серий не получены стойкие результаты, следует подготовить дополнительные серии и провести их анализ. Аналитическая чувствительность связана со специфическим рядом параметров теста, которые необходимо точно определить и стандартизировать, например, с количеством микроскопических полей для чтения в IF-анализе, а также с порогом оптической плотности в анализе ELISA.Аналитическая специфичность Проведите анализ специфичности антител (во-первых) на штаммах бактерии-мишени, распространяющийся на генетическое разнообразие, разное географическое происхождение и растения-хозяева и (во-вторых) на ряде бактерий, не являющихся мишенями, в особенности тех бактерий, которые встречаются в материале образцов. Используйте суспензию чистых культур клеток в концентрации примерно 106 клеток на миллилитр, а также разбавленные в рабочей концентрации антитела или антисыворотку.

Селективность Определите относительную нечувствительность теста к вариациям материала образца, например, используя различные сорта растения-хозяина.

Повторяемость Проведите анализ 8-и репликатов экстрактов заражённых образцов со средним и низким уровнями заражённости. Для выявления латентного заражения, повторяемость должна быть подтверждена около порога аналитической чувствительности.

Эта оценка позволяет получить данные об уровне недостоверности результатов теста.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Методы посева на питательную среду: выделение на селективной среде

Аналитическая чувствительность Проведите анализ не менее 3-х серий экстрактов искусственно зараженных образцов в пределах от 10 до 106 клеток организма-мишени на миллилитр.

Предпочтительно проводить данную процедуру путём десятикратного разбавления суспензии клеток бактерии-мишени в экстрактах образцов. Определите наименьшую концентрацию клеток, обеспечивающую положительный результат.

Если после трех серий не получены стойкие результаты, следует подготовить дополнительные серии и провести их анализ.

Аналитическая чувствительность связана с рядом специфических параметров теста, которые необходимо точно определить и стандартизировать, например, с торговой маркой ингредиентов для приготовления среды (в особенности антибиотиков и препаратов исходных растворов), а также с условиями инкубации.

Аналитическая специфичность Определите специфичность питательной среды (во-первых) на штаммах бактерии-мишени, с учётом генетического разнообразия, разного географического происхождения и разных растений-хозяев и (во-вторых) на ряде бактерий, не являющихся мишенями, в особенности на тех бактериях, которые встречаются в материале образцов. Используйте суспензию клеток в концентрации примерно 106 клеток на миллилитр и проведите анализ путём разбавления посева раствора.

Селективность Определите относительную нечувствительность теста к вариациям материала образца, например, используя различные сорта растения-хозяина.

Повторяемость Проведите анализ 8-и репликатов экстрактов заражённых образцов со средним и низким уровнями заражённости.

Для выявления латентного заражения, повторяемость должна быть подтверждена около пределов аналитической чувствительности.

Эта оценка позволяет получить данные об уровне недостоверности результатов теста.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Методы биоопытов: селективное обогащение в растениях-хозяевах

Аналитическая чувствительность Проведите анализ не менее 3-х серий экстрактов заражённых образцов в пределах от 100 до 106 клеток организма-мишени на миллилитр. Предпочтительно проводить данную процедуру путём десятикратного разбавления суспензии клеток бактерии-мишени в экстрактах образцов. Определите наименьшую концентрацию клеток, обеспечивающую положительный результат. Это требует выделения из тестируемых растений с симптомами инфекции и без.

Если после трех серий не получены стойкие результаты, следует подготовить дополнительные серии и провести их анализ. Аналитическая чувствительность связана со специфическим рядом параметров анализа, которые необходимо точно определить и стандартизировать, например, со стадией развития подопытных растений, методом инокуляции и условиями инкубации.

Аналитическая специфичность Определите специфичность биотеста (во-первых) на штаммах бактерии-мишени, с учётом генетического разнообразия, разного географического происхождения и растений-хозяев и (во-вторых) на ряде бактерий, не являющихся мишенями, в особенности на тех бактериях, которые встречаются в материале образцов. Используйте суспензию клеток в концентрации около 106 клеток на миллилитр.

Селективность Определите относительную нечувствительность анализа к вариациям материала образцов, например, используя различные сорта растения-хозяина, включая наиболее восприимчивые сорта.

Повторяемость Проведите анализ 8-и репликатов экстрактов заражённого образца со средним и низким уровнями заражённости. Для выявления латентного заражения повторяемость должна быть подтверждена около пределов аналитической чувствительности.

Эта оценка позволяет получить данные об уровне недостоверности результатов теста.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Тест на патогенность

Аналитическая чувствительность Данный параметр не является существенным при проведении теста на патогенность, который обычно проводится с суспензиями, содержащими около 106 клеток на миллилитр. Тем не менее, аналитическая чувствительность может рассматриваться при инокуляции на различных стадиях роста растения-хозяина.

Аналитическая специфичность Определите специфичность теста на патогенность на ряде штаммов бактерии-мишени, с учётом генетического разнообразия, разного географического происхождения и растений-хозяев, а также на ряде бактерий, не являющихся мишенями, в особенности на тех бактериях, которые встречаются в материале образцов. Используйте суспензии клеток в концентрации около 106 клеток на миллилитр.

Положительный результат предполагает проявление симптомов и повторное выделение бактерии-мишени (постулаты Коха).

Селективность Определите относительную нечувствительность анализа к вариациям материала образцов, например, используя различные сорта растения-хозяина.

Повторяемость Проведите анализ 3-х репликатов ряда штаммов бактерии-мишени, учитывая вариабельность идентификационных тестов и вирулентность. Используйте суспензию клеток в соотношении примерно 106 клеток/мл1.

Положительный результат предполагает проявление симптомов и повторное выделение бактерии-мишени (постулаты Коха).

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Методы генетической экспертизы: анализ профиля белков, жирных кислот и ДНК

Аналитическая чувствительность Определите минимально необходимое количество бактерий, отобранных из селективной среды, для проведения надёжного анализа.

Параметры теста должны быть точно определены и стандартизированы, например, параметры питательной среды и стадии выращивания культуры для сбора клеток.

Аналитическая специфичность Определите специфичность методов генетической экспертизы (во-первых) на штаммах бактерии-мишени, с учётом генетического разнообразия, разного географического происхождения и разных растений-хозяев и (во-вторых) на ряде бактерий, не являющихся мишенями, в особенности на тех бактериях, которые встречаются в материале образцов.

Предоставьте маркёры для дифференциации на уровне подвида или патотипа.

Селективность Не применяется.

Повторяемость Проведите анализ 3-х репликатов экстракта белка, жирной кислоты или ДНК.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Таблица 5. Ботаника

Данные, приведённые в таблицах, основаны на опыте по валидации, полученном специалистами групп экспертов ЕОКЗР, занимающихся вопросами диагностики. Может возникнуть необходимость в отклонении от данного руководства в зависимости от сочетаний вредных организмов и растений. В таких случаях следует документально фиксировать причины этих отклонений.

Метод выделения организма-мишени из природного субстрата

Примечание: валидация метода выделения всегда проводится при помощи теста.

Аналитическая чувствительность Определите количество семян сорняков, полученных с использованием этого метода выделения.

Аналитическая специфичность Не применяется

Селективность Не применяется

Повторяемость Используйте не менее 8-и образцов из партий семян или зерна, или других растительных продуктов для выделения тех же организмов-мишеней.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Морфологические и морфометрические методы, предназначенные для идентификации

Аналитическая чувствительность Определите минимальное количество организма-мишени (семян или растений), необходимое для проведения надежного анализа. Наименьшее количество организма-мишени зависит от состояния образца (от хорошего до очень плохого), стадии развития, известной межвидовой изменчивости, сложности интерпретации характеристик и т.д.Аналитическая специфичность Проведите скрининг по отношению к схожим организмам, являющимся и не являющимся мишенями.

Селективность Не применяется.

Повторяемость Проведите не менее 8-и идентификаций одного и того же организма-мишени (семян или растений) в качестве контрольного опыта в пределах ряда морфологически схожих организмов, являющихся и не являющихся мишенями. Контрольный опыт может быть проведён следующим образом: один и тот же организм-мишень помещается среди нескольких организмов, не являющихся мишенями. Этот процесс повторяется 8 раз. Организмы, не являющиеся мишенями, в разных повторностях могут быть разными.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Таблица 6. Энтомология

Данные, приведённые в таблицах, основаны на опыте по валидации, полученном специалистами групп экспертов ЕОКЗР, занимающихся вопросами диагностики. Может возникнуть необходимость в отклонении от данного руководства в зависимости от сочетаний вредных организмов и растений. В таких случаях следует документально фиксировать причины этих отклонений.

Метод выделения организма-мишени из природного субстрата

Примечание: валидация метода выделения всегда проводится при помощи теста.

Аналитическая чувствительность Выделение насекомых: если возможно, определите процент насекомых, полученных с использованием этого метода выделения. Выделение ДНК: эта валидация включена в валидацию молекулярных методов.

Аналитическая специфичность Не применяется

Селективность Не применяется

Повторяемость Не применяется

Воспроизводимость Не применяется.

Морфологические и морфометрические методы, предназначенные для идентификации

Аналитическая чувствительность Если возможно, установите минимальное количество особей или признаков для проведения надёжного анализа, как минимум, с 3-я повторами. Наименьшее количество особей-мишеней зависит от состояния образца (от хорошего до очень плохого), стадии развития, известной межвидовой изменчивости, сложности интерпретации характерных признаков и т.д.Аналитическая специфичность Если возможно, проведите скрининг по отношению к морфологически схожим организмам, являющимся и не являющимся мишенями.

Селективность Не применяется.

Повторяемость Проведите не менее 8-и идентификаций одного и того же препарата-мишени в качестве контрольного опыта в пределах морфологически схожих организмов, не являющихся мишенями. Контрольный опыт может быть проведен следующим образом: один и тот же образец-мишень помещается среди нескольких организмов, не являющихся мишенями. Этот процесс повторяется 8 раз. Используемые образцы, не являющиеся мишенями, в разных повторностях могут быть разными.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Молекулярные методы, например, гибридизация, ПЦР

Примечание: этот этап также включает в себя методы выделения ДНК из материала образца.

Аналитическая чувствительность Подготовьте необходимое количество особей. Это количество зависит от рода, вида и стадии развития. Определите минимальное количество особей или частей особей, необходимых для их выявления.

Проведите не менее 3-х экспериментов. Если после трех серий не получены стойкие результаты, следует подготовить дополнительные серии и провести их анализ.

Аналитическая чувствительность связана с рядом специфических параметров теста, которые необходимо точно определить и стандартизировать, например, с торговой маркой реагентов для ПЦР (в частности, ДНК-полимераза) и с условиями проведения цикла ПЦР.

Аналитическая специфичность Проведите, как минимум, один скрининг по отношению к ряду организмов-мишеней, с учётом генетического разнообразия, разного географического происхождения и разных растений-хозяев, и по отношению к релевантным организмам, не являющимся мишенями, особенно к тем, которые могут быть обнаружены в материале образцов.

Кроме того, результаты теста могут быть подтверждены компьютерным (in silico) сравнением последовательностей зондов и праймеров с последовательностями в геномных библиотеках.

Селективность Определите относительную нечувствительность теста к вариациям материала образца, например, используя различные сорта растения-хозяина.

Повторяемость Проведите анализ одного образца для каждого из 2-х уровней модальности (на границе порога выявления организма-мишени и выше), с использованием не менее 8-и репликатов экстракта образца.

Этот анализ позволяет получить данные об уровне недостоверности результатов теста.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Таблица 7. Микология

Данные, приведённые в таблицах, основаны на опыте по валидации, полученном специалистами групп экспертов ЕОКЗР, занимающихся вопросами диагностики. Может возникнуть необходимость в отклонении от данного руководства в зависимости от сочетаний вредных организмов и растений. В таких случаях следует документально фиксировать причины этих отклонений.

Метод выделения/изоляции организма-мишени из природного субстрата/методы приманок

Примечание: валидация метода выделения всегда проводится при помощи теста.

Аналитическая чувствительность Метод должен позволять выделить и изолировать достаточное количество организма-мишени для дальнейшего выращивания в культуре и проведения анализа. Во всех возможных случаях определите путём смешивания здоровой и заражённой тканей минимальное количество заражённой ткани или организмов (или их частей), необходимых либо для посева на питательную среду перед идентификацией, либо для непосредственной идентификации с тем, чтобы провести надёжный анализ.

Выделите или изолируйте организм-мишень из не менее, чем 3-х образцов (образцов, заражённых естественным или искусственным образом).

Данная процедура может включать в себя промывание и использование мембран для улавливания спор.

Аналитическая специфичность Данный параметр не является важным. Выделение организма-мишени из образца является неспецифичным по определению.

Селективность Данный параметр не является важным. Выделение организма-мишени из образца является неселективным по определению.

Повторяемость Используйте один образец с низкой концентрацией организма-мишени и подготовьте 8 подвыборок (экстрактов). Оцените эффективность метода выделения при помощи соответствующего теста.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Морфологические и морфометрические методы для идентификации:

Аналитическая чувствительность Определите минимальное количество характеристик, необходимое для проведения надёжной идентификации, причем минимальное количество повторностей, по возможности, должно составлять 3. Наименьшее количество характеристик зависит от состояния образца (от хорошего до очень плохого), стадии развития, известной межвидовой изменчивости, сложности интерпретации характеристик и т.п.Аналитическая специфичность Проведите скрининг по отношению к ряду морфологически схожих организмов, являющихся и не являющихся мишенями.

Селективность Не применяется.

Повторяемость Не менее 8-и идентификаций одного и того же организма-мишени в качестве контрольного опыта в пределах ряда морфологически схожих организмов, являющихся и не являющихся мишенями. Контрольный опыт может быть проведен следующим образом: один и тот же организм-мишень помещается среди нескольких организмов, не являющихся мишенями. Этот процесс повторяется 8 раз. Организмы, не являющиеся мишенями, в разных повторностях могут быть разными.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Молекулярные методы, например, гибридизация и ПЦР

Примечание: этот этап также включает в себя методы выделения ДНК из материала образцов.

Аналитическая чувствительность Определите минимальное количество организма-мишени (например, количество конидий или пропорцию заражённого материла в здоровом материале), из которого можно получить поддающееся выявлению количество ДНК организма-мишени. Проведите не менее 3-х экспериментов при помощи 8-и последовательных разбавлений, предпочтительно в ДНК растения-хозяина. Если после трёх серий не получены стойкие результаты, следует подготовить дополнительные серии и провести их анализ.

Аналитическая чувствительность связана с рядом специфических параметров теста, которые необходимо точно определить и стандартизировать, например, с торговой маркой реагентов ПЦР (в особенности, ДНК-полимеразы) и условиями проведения цикла ПЦР.

Аналитическая специфичность Проведите, как минимум, один скрининг по отношению к ряду организмов-мишеней и значимых организмов, не являющихся мишенями (например, филогенетически близких грибов), которые могут присутствовать в образце и экстракте образца.

Кроме того, результаты анализа могут быть подтверждены компьютерным (in silico) сравнением последовательностей зондов или праймеров с последовательностями в геномных библиотеках.

Селективность Определите относительную нечувствительность анализа к вариациям образцов, например, с использованием различных сортов растений-хозяев.

Повторяемость Проведите 3 эксперимента выше порога выявления и около порога выявления, как минимум, с 8-ю репликатами. Эта процедура может показать уровень недостоверности измерений.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Серологические методы: ELISA

Аналитическая чувствительность Определите порог выявления, например, количество конидий или массу заражённого материла в здоровом материале, путём проведения не менее 3-х экспериментов. Определите пороговый уровень, при котором достигается постоянная правильная диагностика (как правило, это в 2-3 раза превышает уровень отрицательного контроля). Если после трёх экспериментов не получены стойкие результаты, следует провести дополнительные серии экспериментов.

Аналитическая специфичность Проведите скрининг один раз по отношению к ряду родственных организмов-мишеней и к ряду неродственных организмов, не являющихся мишенями (например, филогенетически близких грибов), которые могут присутствовать в образце и экстракте образца.

Селективность Определите относительную нечувствительность теста к вариациям образца, например, с использованием различных сортов растений-хозяев.

Повторяемость Проведите 3 эксперимента выше порога выявления и около порога выявления, как минимум, с 8-ю репликатами в тот же день, тем же оператором и на той же среде. Данная проверка позволяет получить данные об уровне недостоверности результатов теста.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Методы биоопытов: метод приманок

Аналитическая чувствительность Определите необходимое количество природного субстрата или экстракта субстрата (например, граммов листьев или почвы) для получения симптомов. Проведите 3 эксперимента с 8 сериями разбавлений с 10-ю растениями.

Если после трёх циклов не получены стойкие результаты, следует подготовить дополнительные серии и провести их анализ.

Аналитическая чувствительность связана с рядом специфических параметров теста, которые необходимо точно определить и стандартизировать, например, со стадией развития подопытного растения, с методом инокуляции и условиями инкубации.

Аналитическая специфичность Определите специфичность биотеста (во-первых) на штаммах гриба-мишени, с учётом генетического разнообразия, разного географического происхождения, (во-вторых) на ряде грибов, не являющихся мишенями, в частности, на грибах, связанных с материалом образцов.

Селективность Определите относительную нечувствительность теста к вариациям материала образца, например, с использованием различных сортов растений-хозяев.

Повторяемость Проведите 3 эксперимента не менее, чем с 8-ю репликатами при минимальном и превышающем минимум количестве инокулята для получения симптомов.

Для выявления латентного заражения, повторяемость должна быть подтверждена около предела аналитической чувствительности.

Данная проверка позволяет получить данные об уровне недостоверности результатов теста.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Таблица 8. Нематология

Данные, приведённые в таблицах, основаны на опыте по валидации, полученном специалистами групп экспертов ЕОКЗР, занимающихся вопросами диагностики. Может возникнуть необходимость в отклонении от данного руководства в зависимости от сочетаний вредных организмов и растений. В таких случаях следует документально фиксировать причины этих отклонений.

Метод выделения организма-мишени из природного субстрата

Примечание: метод выделения всегда проходит валидацию при помощи теста.

Аналитическая чувствительность Определите процент нематод, полученных путем выделения, с использованием не менее 3-х образцов.

Аналитическая специфичность Не применяется.

Селективность Оцените селективность теста по отношению к разным природным субстаратам (например, для цистовыделителей – к типу почв)

Повторяемость Используйте один образец организма-мишени и сделайте 8 подвыборок (экстрактов). С помощью соответствующего метода анализа оцените, колеблется ли процент выделений в этих подвыборках в одинаковых пределах.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Морфологические и морфометрические методы, предназначенные для идентификации

Аналитическая чувствительность Определите минимальное количество особей для проведения надежной идентификации не менее чем в трёх повторностях при возможности. Минимальное количество особей-мишеней зависит от состояния образца (от хорошего до очень плохого), стадии развития, известного межвидового разнообразия, сложности по интерпретации характерных признаков и т.п.Аналитическая специфичность Проведите скрининг по отношению к ряду морфологически сходных организмов, являющихся и не являющихся мишенями.

Селективность Не применяется.

Повторяемость Проведите не менее 8-и идентификаций как «тест вслепую» одного и того же микроскопического препарата в ряде морфологически схожих организмов, являющихся и не являющихся мишенями. Тест вслепую должен проводиться следующим образом: один и тот же препарат с организмом-мишенью представлен среди нескольких препаратов организмов, не являющихся мишенями. Тест вслепую повторяется 8 раз, а организмы, не являющиеся мишенями могут быть разными в разных повторностях.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Молекулярные методы, например, гибридизация и ПЦР

Примечание: этот этап включает в себя методы выделения ДНК из материала образцов.

Аналитическая чувствительность Подготовьте необходимое количество особей. Это количество зависит от рода, вида и стадии развития. Определите минимальное количество особей или частей особей для выявления или идентификации. Проведите не менее 3-х опытов. Если после 3-х серий опытов не получены согласующиеся результаты, то необходимо подготовить дополнительные серии и провести тестирование. Аналитическая чувствительность связана со специфической группой параметров теста, которые должны быть чётко определены и стандартизированы, например, с торговой маркой реагентов для ПЦР (в особенности, полимеразы ДНК) и с условиями циклов ПЦР.

Аналитическая специфичность Проведите скрининг, как минимум, один раз по отношению к ряду организмов-мишеней, с учётом генетического разнообразия, разного географического происхождения и разных растений-хозяев, а также подходящих организмов, не являющихся мишенями, в особенности тех, которые могут быть связаны с материалом образцов.

Кроме того, результаты анализа могут быть подтверждены компьютерным (in silic) сравнением последовательностей зондов и праймеров с последовательностями в геномных библиотеках.

Селективность Не является существенным для идентификации нематод, поскольку их заранее выделяют из субстрата. Если применяется ПЦР-тест в качестве теста на выявление, необходимо определить интенсивность теста в зависимости от природного субстрата (например, почвы или растения).

Повторяемость Проведите анализ одного образца на каждом их двух уровней модальности (около порога выявления вредного организма и выше) как минимум с 8-ю репликатами экстракта образца.

Этот анализ предоставит информацию об уровне недостоверности результата теста.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Биохимические методы: например, энзимный электрофорез, анализ протеинового профиля,

Примечание: этот этап также включает в себя подготовку препарата образца.

Аналитическая чувствительность Определите минимальное количество особей для выявления, чтобы провести надёжный анализ по возможности с не менее чем тремя образцами. Минимальное количество особей-мишеней зависит от состояния образца (от хорошего до очень плохого), стадии развития, известного межвидового разнообразия, сложности интерпретации характерных признаков и т.п.Параметры теста должны быть чётко определены и стандартизированы.

Аналитическая специфичность Проведите скрининг по отношению к ряду организмов-мишеней и организмов рода и/или вида, не являющихся мишенями.

Селективность Не применяется.

Повторяемость Проведите анализ 1 образца для каждого из двух уровней численности: выше минимального количества особей или соответствующего ему. Сделайте не менее 8-и репликатов из одного и того же экстракта образца.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Биотесты: включая методы приманок и тесты на патогенность

Аналитическая чувствительность Определите минимальное количество особей для получения симптомов или для размножения в растительном материале как минимум с 3-я повторностями по возможности.

Аналитическая чувствительность связана с рядом специфических параметров теста, которые необходимо точно определить и стандартизировать, например, со стадией развития подопытного растения и с методом инокуляции.

Аналитическая специфичность Проведите скрининг по отношению к ряду организмов-мишеней.

Селективность Определите относительную нечувствительность теста к вариациям материала образцов, например, с использованием различных сортов растений-хозяев.

Повторяемость Используйте не менее 3-х репликатов с минимальным количеством особей для получения симптомов.

Эта проверка позволяет получить данные об уровне недостоверности результатов теста.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Таблица 9. Вирусология

Эта таблица распространяется на вирусы, вироиды и фитоплазмы.

Данные, приведённые в таблицах, основаны на опыте по валидации, полученном специалистами групп экспертов ЕОКЗР, занимающихся вопросами диагностики. Может возникнуть необходимость в отклонении от данного руководства в зависимости от сочетаний вредных организмов и растений. В таких случаях следует документально фиксировать причины этих отклонений.

Метод выделения организма-мишени из природного субстрата (геномного материала или организма)

Примечание: метод выделения всегда проходит валидацию при помощи теста.

Аналитическая чувствительность Метод должен быть способен выделить достаточное количество организма-мишени или его ДНК, РНК или белка из соответствующего опытного образца. Выделите организм-мишень не менее чем из 3-х образцов.

Аналитическая специфичность Данный параметр не является важным. Выделение организма-мишени из образца является неспецифичным по определению.

Селективность Селективность теста определяется так же, как описано для чувствительности, на различных сортах растений-хозяев.

Повторяемость Используйте один образец с низкой концентрацией организма-мишени и подготовьте 8 подвыборок (экстрактов). Оцените эффективность выделения при помощи соответствующего теста.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Молекулярные методы, например, гибридизация, ПЦР и ПЦР в реальном времени.

Примечание: этот этап включает в себя методы выделения ДНК или РНК из материала образца.

Аналитическая чувствительность Так как концентрация вирусов, вироидов и фитоплазм никогда не является известной, определите максимальное разбавление выявленной ДНК или РНК. Определённая чувствительность является относительной чувствительностью, а не абсолютной.

Проведите не менее 3-х экспериментов при помощи 8-и серий разбавлений. Если после трёх серий не получены стойкие результаты, следует подготовить дополнительные серии и провести их анализ.

Аналитическая чувствительность связана с рядом специфических параметров теста, которые необходимо точно определить и стандартизировать, например, с торговой маркой реагентов ПЦР (в особенности, ДНК-полимеразы) и с условиями проведения цикла ПЦР.

Аналитическая специфичность Проведите скрининг по отношению к ряду организмов, являющихся и не являющихся мишенями, которые могут присутствовать в образце.

Кроме того, результаты анализа могут быть подтверждены компьютерным (in silico) сравнением последовательностей зондов и праймеров с последовательностями в геномных библиотеках.

Селективность Необходимо учитывать возможные воздействия на аналитическую чувствительность. Определите влияние природного субстрата путём добавления положительного образца в живицу различных сортов культуры.

Повторяемость Используйте не менее одного образца для каждой из 2-х модальностей (с учётом результатов по аналитической чувствительности) с низким и средним уровнями численности организма-мишени, с минимумом в две подвыборки от каждой модальности, с не менее чем тремя, но предпочтительно, с восьмью репликатами в каждой подвыборке.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Серологические методы: ELISA и прямой иммунологический блот-анализ ткани.

Аналитическая чувствительность Так как концентрация вирусов никогда не является известной, то используйте один здоровый образец (того же природного субстрата, который должен пройти валидацию), подготовьте не менее 8-и подвыборок для определения стандартного отклонения оптической плотности (ОП) для определения фоновой реакции.

Проведите не менее 3-х экспериментов с 8-ю сериями разбавлений положительного образца в здоровом материале. В каждом эксперименте проведите две повторности для каждого последовательного разбавления.

Определите максимальное разбавление экстрактов образца, при котором организм-мишень может быть выявлен. Если после трёх серий не получены стойкие результаты, следует подготовить дополнительные серии и провести их анализ.

Чувствительность, установленная при этом, является относительной, а не абсолютной.

Аналитическая чувствительность связана с рядом специфических параметров теста, которые необходимо точно определить и стандартизировать, например, с порогом оптической плотности (ОП) в тесте ELISA.

Аналитическая специфичность Проведите скрининг антител по отношению к ряду родственных организмов-мишеней и значимых организмов, не являющихся мишенями, которые могут присутствовать в образце.

Селективность Следует учитывать возможные воздействия на аналитическую чувствительность. Определите воздействие природного субстрата путём добавления положительного образца в живицу различных сортов культуры.

Используйте не менее 2-х подвыборок для каждого организма-мишени.

Повторяемость Используйте не менее 3-х образцов при низком уровне численности организма-мишени (с учётом результатов по аналитической чувствительности), с двумя подвыборками от каждого образца, а также с 8-ю различными чашками (тестами) в каждой подвыборке.

Этот анализ позволяет получить данные об уровне недостоверности результатов теста.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Методы биоопытов: анализ растений (главным образом используется в качестве анализа на подтверждение присутствия вирусов и вироидов, но не фитоплазм) заражённых непосредственно и путём прививки.

Аналитическая чувствительность Определите максимальное разбавление инокулята в буфере для получения симптомов или размножения в растении. Это всего лишь приблизительный расчёт разбавлений, которые могут быть использованы. Используйте 1 репрезентативный образец и 3 подвыборки для каждого разбавления. Чувствительность, установленная при этом, является относительной, а не абсолютной.

Аналитическая чувствительность связана с рядом специфических параметров теста, которые необходимо точно определить и стандартизировать, например, со стадией развития подопытных растений, с методом инокуляции и условиями инкубации. Она не существенна для прививок.

Аналитическая специфичность Определите специфичность теста (во-первых) на штаммах организма-мишени, с учётом генетического разнообразия, разного географического происхождения и разных растений-хозяев, и (во-вторых) на ряде организмов, не являющихся мишенями, в частности, на тех, которые встречаются в материале образцов.

Селективность Определите относительную нечувствительность теста к вариациям материала образца, например, с использованием различных сортов растений-хозяев.

Повторяемость Используйте один репрезентативный образец (с восьмью растениями для каждого хозяина) соответствующего разбавления, определённого в анализе на чувствительность, и используйте растения-хозяева, определённые в анализе на специфичность.

Этот анализ позволяет получить данные об уровне недостоверности результатов теста.

Воспроизводимость Так же, как и для повторяемости, но, по возможности, с другим(ми) оператором(ами), в другие дни и, в соответствующих случаях, с другим оборудованием.

Биохимические методы: например, электрофорез и R-PAGE.

Аналитическая чувствительность Определите максимальное разбавление особей-мишеней, нуклеиновой кислоты или белка для проведения надёжного анализа. Чувствительность, установленная при этом, является относительной, а не абсолютной. Отметьте положительные и отрицательные реакции.

Параметры теста должны быть чётко определены и стандартизированы.

Аналитическая специфичность Сравните со значимыми организмами, белками или засоряющими веществами и покажите, что можно проводить дифференциацию. Также исследуйте межвидовую изменчивость. Определите, какие характеристики следует идентифицировать.

Селективность Не применяется.

Повторяемость Сделайте анализ не менее 8-и репликатов одного и того же экстракта образца с низкими уровнями численности организма-мишени. Эти уровни следует определять как пропорциональные аналитической чувствительности.

Воспроизводимость Определяют, как и для повторяемости, но соответствующие условия, например, оператор, время проведения, задержка проведения и условия хранения после приготовления образца, варьируют для оценки гибкости теста. Для этого требуется не менее 8-и репликатов. Также можно варьировать реагенты и оборудование.

Эти условия требуют не менее 3-х репликатов со сравнимыми результатами.




Похожие работы:

«МБОУ "СОШ №51 "Центр образования" г. Рязани 390048, г. Рязань, ул. Зубковой, д. 22а http://www.shkola051.ru/ MY BOOK OF RECORDS School Form _ _ Ryazan, 20155. What would you like to see and visit? I’d like to see I’d like to visit the tallest oldest biggest smallest longest shortest animal....»

«Тест "Опорно-двигательная система" 7 класс (по учебнику В.В. Латюшин, В.А. Шапкин) Выберите один правильный ответ из предложенных вариантов ответа.1. Осевой скелет – этоА) позвоночникБ) грудная клеткаВ) шейный позвонок земноводных2. У большинства млекопитающих позвонков в шейном отделе: А) 5 Г) 3 Б) 7 Д) 2 В) 6...»

«Рейтинг участия спортсменов Осташковского района в официальных спортивных соревнованиях в 2015 2016 г.КОНКУРС "ЮНЫЕ ДАРОВАНИЯ СЕЛИГЕРСКОГО КРАЯ 2015-2016 г." МАЛЬЧИКИ 2004 г.р. и младше № Ф.И.О. Год рождения ВИДСПОРТА ТРЕНЕР ОЧКИ 1 Варваркин Егор 2005 спортивная борьба, сумо Петров М.А. 380 2 Стрелков Федор 2004 спортивная борь...»

«"Необыкновенные животные" Час интересных сообщений Для 5 кл. Щербинина О.В., библиотекарь школы-гимназии № 7.Ход мероприятия:Добрый день. Сегодня мы с вами будем заочно путешествовать по миру и узнаем много необыкновенного и интересного о нем. А...»

«РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯРЕСПУБЛИКА АДЫГЕЯАДМИНИСТРАЦИЯ МУНИЦИПАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ " ГОРОД АДЫГЕЙСК"П О С Т А Н О В Л Е Н И Е от 24 февраля 2015 г. № 32 г. Адыгейск О порядке формирования, ведения и утверждения ведомственных переч...»

«Всероссийский молодежный фестиваль "Космофест – Восточный 2017" место встречи будущих покорителей космоса. "Космофест" в Приамурье проводится в третий раз. В этом году гостей фестиваля приветствовали представители гос...»

«Гомеопатический Опросник для детей Пожалуйста, отвечайте на вопросы подробно, не пишите только да или нет. Не надо долго думать над ответом, пишите то, что сразу приходит на ум. Если почувствуете усталость, то отдохните. Подробно отвечая на все вопросы,...»

«КАЛЕНДАРЕН ПЛАН НА АТД при БАНСЕПТЕМВРИ – ДЕКЕМВРИ 2017 г.СЕПТЕМВРИ 1 3 септември Родопи: Дяволската екопътека Нина Колева 17 септември Софийска планина: с. Лукорско Ловен заслон – с. Лукорско Мариета Антонова 0896 65 01 33 21 24 септември Мистичната България 5 част: Красотаа и мистиката на Северното ни черноморие Лена Апостолова 02 989 22 41...»

«ПРОМЕЖУТОЧНАЯ АТТЕСТАЦИОННАЯ КОНТРОЛЬНАЯ РАБОТА ПО АНГЛИЙСКОМУ ЯЗЫКУ ДЛЯ 7 КЛАССА I READING (Прочитай текст) Mary Ann was a little girl of eight years old. She was sitting at the desk working at her Maths problems. Her mother entered the room. “ Mary Ann, if you are a good...»

«И.Д. Зольников, А.В. Выборнов, А.А. Картозия, В.С. Славинский, А.А. Цыбанков, А.В. Постнов, С.К. Васильев Институт археологии и этнографии СО РАН, Новосибирск (vse-snega@yandex.ru; vybornov@archaeology.nsc.ru; kartoziya-444@mail.ru; slavinski@yandex.ru; tsybankov@yandex.ru; postnov@y...»

«Документ предоставлен КонсультантПлюсПРАВИТЕЛЬСТВО ХАНТЫ-МАНСИЙСКОГО АВТОНОМНОГО ОКРУГА ЮГРЫПОСТАНОВЛЕНИЕ от 9 октября 2013 г. N 410-пО ГОСУДАРСТВЕННОЙ ПРОГРАММЕХАНТЫ-МАНСИЙСКОГО АВТОНОМНОГО ОКРУГА ЮГРЫ РАЗВИТИЕИ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МИНЕРАЛЬНО-СЫРЬЕВОЙ БАЗЫ ХА...»

«( Фонограмма № 1. Выход под музыку участников юношей)Все вместе: -Все! Все! Все! Все на праздник! 1юМасленицу начинаем, гостей приглашаем! 2ю-Приходите все без стеснения! Билетов не надо предъявите х...»

«Контрольная тестовая работа по теме "Основы учения о клетке" (9 класс) Вариант 1 Часть 1 Выберите один правильный ответ из четырёх предложенных, в бланке ответов под номером выполняемого задания (А1 – А10) поставьте знак "" в клеточку, номер которой соответствует номеру выбранного вами ответа. А1. Элементарной струк...»

«ПРАВИТЕЛЬСТВО ПЕНЗЕНСКОЙ ОБЛАСТИР А С П О Р Я Ж Е Н И Е center-16891000 от 10 июля 2017 года № 329-рП г.Пенза О развитии и внедрении новых форм работы общественных приемных исполнительных органов государственной власти Пензенской области (регион-центров) с целью эффективного взаим...»

«СЦЕНАРИЙ СПОРТИВНОГО ПРАЗДНИКА В СРЕДНЕЙ ГРУППЕ, ПОСВЯЩЁННОГО 23 ФЕВРАЛЯ Цель: расширять представления детей о государственном празднике, и защитниках Отечества. Воспитывать любовь к Родине и желание вырасти похожими на смелых и умелых солдат.Оборудование: 2 конус...»

«Пояснительная записка Составлена на основе авторской программы М.В. Вербицкой "Английский язык 5-7 класс." Учебник "Forward" 5-7 класс. Авторы: М.В. Вербицкая. Программа рассчитана на 102 часа, контр...»

«Информация о проведении областного смотра-конкурса знаменных групп "Равнение на знамя!", посвященного 70-й годовщине Победы советского народа в Великой Отечественной войне "Тебе поем мы славу, наше зн...»

«Приложение №5РАСПИСКА о получении заявки на участие в конкурсе по отбору управляющей организации для управления многоквартирным домом Настоящая расписка выдана претенденту _ (наименование организации или ф.и.о. индивидуального...»

«"ХОЧУ БЫТЬ СНЕГУРОЧКОЙ!!!" Зима Баба Яга Дочка Бабы Яги Ягушечка Дед Мороз Снегурочка Зима: Ах, как красива елочка! А детки — как картинки! Ну, здравствуйте, ребятки— Снежинки, Буратинки! Явилась вслед за осенью Я по календарю. Я самый лучший праздник вам На радость подарю! А землю белым снегом я Укутала сама. Ребята, отгадайте...»

«Цены на ОЗДОРОВИТЕЛЬНЫЕ путевки в санаторий Россияс 01 октября по 24 декабря 2014г. Стоимость указана на человека (проживание, 3-х разовое питание (заказное меню или "шведский стол"), посещение ЛОК АкваВитаТерм, через 2 дня по 1 часу) Для взрослых Цена одного места в номере Категория размещен...»

«Протокол о допуске по закупке продукции для организаций системы ОАО "АК "Транснефть" Лот № А-3.21.16 "Регулирующая арматура (регуляторы давления)" № А-3.21.16/Д19.08.2015 г. 13:00 ч.г. Санкт-ПетербургИнформация о лоте: Наименование Лот № А-3.21.16 "Регулирующая арматура (регуляторы давления)" Организатор закупки З...»

«ЗЕМСКОЕ СОБРАНИЕ ВЕРЕЩАГИНСКОГО МУНИЦИПАЛЬНОГО РАЙОНАРЕШЕНИЕ от 29 сентября 2011 г. N 22/251О ПОЛОЖЕНИИ О КОНТРОЛЬНО-СЧЕТНОЙ ПАЛАТЕ ВЕРЕЩАГИНСКОГОМУНИЦИПАЛЬНОГО РАЙОНА (в ред. решений Земского Собрания Верещагинскогомуниципального района от 02.11.2011 N 23/262, от 07.03.2012 N 27/318, от 01.11.20...»

«Группа 02 Мясо и пищевые мясные субпродуктыПримечание:1. В данную группу не включаются:a) продукты товарных позиций 0201 – 0208 или 0210, непригодные или не подходящие для употребления в пищу;б) кишки, пузыри или желудки животных (товарная позиция 0504) или кровь животных (товарная позиция 0511 или 3002); илив) животный жир, кроме про...»

«Контрольная работа № 11. Переведите предложения на русский язык. Подчеркните глагол-сказуемое в каждом предложении и определите видовременные формы глаголов и залог. Образец. You will find this book in the library...»

«Точка 1 № слоя Описание слоя Мощность слоя 1 Рыхлые конгломераты с песчаным красноцветным цементом; плохая сортировка и слабая окатанность обломочного материала 32 2 Пески мелкозернистые, кварцевые с шамозитом; в песках отдельные прослои...»







 
2017 www.docx.lib-i.ru - «Бесплатная электронная библиотека - интернет материалы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.